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CROMATOGRAFÍA
CROMATOGRAFÍA
CROMATOGRAFÍA
CROMATOGRAFÍA
cromatografía
CROMATOGRAFÍA
líquida
¿Qué es la cromatografía?
cromatografía
tienen
fase
estacionaría
fase
móvil
pueden ser:
sólido
líquido
líquido
gas
Cromatografía líquida
puede ser
plana
En columna
CROMATOGRAFÍA LÍQUIDA PLANA
F. MÓVIL
eluyente: disolvente o mezcla de ellos, fácilmente evaporable.
En papel
Fase estacionaría: papel de filtro
En capa fina
Fase estacionaria= placa : adsorbente, los más
usados sílica gel (SiO2 ) y alumina (Al2O3),
adherido a un soporte de plástico, vidrio o
aluminio.
Normalmente
recubierto por
un
indicador
fluorescente
CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA
En capa fina
La fase móvil asciende por
capilaridad a través de la fase
estacionaria, compitiendo con
ésta por los analitos.
Los compuestos más polares quedarán más adsorbidos por la fase
estacionaria mientras que los menos polares avanzarán más con
el eluyente.
En capa fina
En capa fina
Usos:
- Determinar el grado de pureza de un compuesto. Se puede
determinar así, por ejemplo, la efectividad de una etapa de
purificación.
- Comparar muestras. Si dos muestras corren igual en placa
podrían ser idénticas. Si, por el contrario, corren distinto
entonces no son la misma sustancia.
- Realizar el seguimiento de una reacción. Es posible estudiar
cómo desaparecen los reactivos y cómo aparecen los productos
finales o, lo que es lo mismo, saber cuando la reacción ha
acabado.
En capa fina
Ejemplos:
Cromatografía líquida
puede ser
plana
En columna
En columna
Cromatografía en columna
Se puede clasificar
Según
naturaleza f.m
Según mecanismo
separación
puede ser
normal
inversa
adsorción
pueden ser
reparto
intercambio
iónico
afinidad
exclusión
molecular
En columna
f.e polar
normal
Cromatografía
según la
naturaleza de
la f.m
tiene
f.m poco polar
puede ser
f.e poco polar
inversa
tiene
f.m polar
En columna
físico
exclusión
adsorción
Cromatografía
según
fundamento de
su actuación
fisico-químico
partición
puede ser
químico
bioquímico
intercambio iónico
afinidad
Cromatografía adsorción
F.E SÓLIDO ACTIVO
Fundamento:
diferencias de solubilidades en f.m y de
retención en f.e de los componentes de
la mezcla
Cromatografía partición
F.E UN LÍQUIDO ADSORBIDO O LIGADO
A UN SÓLIDO INERTE
Fundamento:
Separación debida a la diferencia de
solubilidades entre ambas fases. Similar
al fenómeno de extracción
Cromatografía exclusión
F.E MATERIAL POROSO
INERTE (GEL)
Fundamento:
separación del soluto según su tamaño
y estructura molecular
Cromatografía afinidad
F.E SOPORTE SÓLIDO CON
UNA SUPERFICIE ACTIVADA
AL QUE SE ENLAZA UN
LIGANDO DE AFINIDAD
Fundamento:
Adsorción reversible y selectiva,
basada en el acoplamiento llavecerradura, entre el analito y ligando
Cromatografía intercambio iónico
F.E SÓLIDO CON CARGA
Fundamento:
La f.e tiene grupos cargados que
interaccionan electroestáticamente
con iones de signo contrario de la f.m
En columna
En ellos se representa la
señal medida frente al
tiempo o volumen de
eluyente.
ABSORBANCIA
Suele llevar acoplado un
detector de manera que
se obtienen los
cromatográmas
VOLUMEN DE SOLVENTE
En columna
El tiempo o volumen de eluyente nos ayudará a determinar que analito es.
La altura y anchura del pico, nos ayudara a cuantificar cuanto analito hay.

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