Examen Directo y Medios de Cultivo

Report
UNIVERSIDAD VERACRUZANA
FAC. DE BIOANALISIS XALAPA
EE. MICOLOGIA
Presentan:
Examen directo y
Medios de cultivo
Rosas Ordoñez Gabriela
Dulce Dilian Ortiz Soto
Cruz Rivera Paula Ameyali
Vela Veliz Mayra Irais
López Guerra Domingo
Lara Sánchez Elías
Reyes Karol Leyda
Recordar que….
Los hongos crecen en dos formas:
Levaduras
• Células únicas de
forma esférica (3-15
µm).
• producto de
gemación.
• pseudohifas
Mohos
• Colonias filamentosas
multicelulares.
• Túbulos cilíndricos
• Micelos
• Algunos divididos por
septos.
Brook G, Butel j, Morse S. 2005.
Especímenes clínicos
Secreción de
heridas
Biopsias
Orina
Cutánea
(pelo, piel,
uñas)
Exudados
mucosas
MO
Sangre
Secreción de
VRB
Reactivos.
Medios de
cultivo.
Equipos .
Personal
Adecuada
y
abundante
Recursos del Lab.
Toma de muestra
Dx Micológico
Con
experiencia
en toma y
manejo
Examen Directo
KOH
• Hidróxido de
potasio…....20 gr
• Glicerol.......20 ml
• Agua destilada.....60
ml
KOH-dimetil
sulfoxido
• Hidróxido de
potasio................10
gr
• Dimetilsulfóxido..40
ml
• Agua
destilada.............50
ml
Sol. Salina
• Cloruro de sodio….
0.85 gr
• Agua destilada. 100
ml
• Limitaciones
Sitio anatómico
Cantidad de
muestra
# de
microorganismos
Tipo de paciente
Calidad del
personal del Lab.
Artefactos
Cultivo de la Muestra (envases)
Cultivo de la Muestra (Agar)
Saburaud
Micosel, micobiótico
•
•
•
•
•
• Harina de soja
• Dextrosa
• Ciclohexamida y cloranfenicol
2% glucosa.
pH 6.9
Medios estándar.
No ideal para esporulación.
Puede contener cloranfenicol o
gentamicina.
Papa-Dextrosa
BHI con/sin Antibiótico
• Base de pulpa de papa.
• Glucosa/dextrosa
• Hongos filamentosos y
levaduras.
• Sangre de carnero.
Como estimulante de pigmento:
• Zanahoria y bilis
Antibiótico:
• Cloranfenicol, Gentamicina,
Cicloheximida.
Colonias de Penicillium expansum (A) y Botrytis
cinerea (B), creciendo en medio Agar Papa Dextrosa.
Conservar a 2-8 °C en una bolsa
Temperatura
• 25-30 °C
• 37 °C
Tiempo
• Levaduras 24-48 hr.
• Hongos filamentosos
• No patógenos 2-4 días
• Patógenos 6-15 días
Identificación de hongos
Color
Tasa de
crecimiento
Textura
•
•
•
•
Algodonosa
Aterciopelada
Granular o polvorienta
glabrosa
Topografía
(colinas y valles)
• Rugosa
• Umbonada
• Verrucosa
• Aplanada
Examen del Cultivo
Cardaje
Azul de algodón de
lactofenol
• Fenol, concentrado..20 ml
• Acido láctico............20 ml
• Glicerol....................40 ml
• Azul de algodón.....0.50 gr
• Agua destilada.........20 ml
Fragmentos hifales
• Metamina
Argentica de
Gomori
• Tiñe de negro la pared
celular
• Ac. Peryodico de
Schiff
• Tiñe de negro la pared
celular
• Cinta Adhesiva
• Microcultivo
Trichophyton rubrum
Trichophyton tonsurans
Trichophyton mentagrophytes
Microsporum canis
Epidermophyton floccosum
Pitiriasis Versicolor
Coccidioides immitis
Fase tisular 37 °C
Fase micelial 25-30 °C
Aspergillus spp.
• Morfología colonial
• Medios de cultivo
Agar
• Saburaud
• Papa-Dextrosa
Extracto de
Malta
• Glucosa 20 g/L
• Extracto de malta
• Peptona 1
• Agar 15
• pH = 5,4
(selectivo)
Czapek-Dox
• Medio para el
cultivo de hongos
y bacterias
capaces de utilizar
el nitrato de sodio
como única fuente
de nitrógeno.
Aspergillus terreus on Czapek dox agar showing
typical suede-like cinnamon-buff to sand brown
colonies while reverse is yellow to deep dirty
• Identificación de Estructuras
Bibliografía
• Murray P, Rosenthal K, Pfaüer M. (2006). Microbiología Medica. 5 edic. Edit. El sevier.
Madrid. España. Pp 734-736.
• Brook G, Butel j, Morse S. (2005). microbiología Medica de Jawetz, Mednick y Adelberg. 25
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2 edic. edit. Salvat. Barcelona. España. P 752.
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[versión web]
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• HWG. (2002-2011). Agar Czapek-Dox . Consultado el 17 de marzo del 2012. disponible en:
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