HIV1/HIV-2 Bioplex® 2200 Ag-Ab assay

Report
LES TECHNIQUES DU DÉPISTAGE ET DU
DIAGNOSTIC VIROLOGIQUE
DES INFECTIONS PAR VIH EN 2013
François Simon CHU St Louis Paris
“Testing is the essential entry point to
timely treatment”
Kevin DeCock, HIV/AIDS Director, WHO
Déclaration lien d’Intérêt
Pour cette présentation,
cet intervenant a déclaré
n’avoir aucun lien d’intérêt
MATRICE UTILISEE pour le dépistage (USA)
Sérum ou plasma : congelés
conservés -20°
Sang total : pas de conservation possible
DBS papier filtre (sérologie , biologie moléculaire)
Liquide craviculaire :
Urine
Calypte HIV-1 Urine EIA Test
FDA approved
home test (Internet)
LES GÉNÉRATION DE TESTS DE DÉPISTAGE VIH
GÉNÉRATION
UE
1ere
2eme
3eme
Lysat viral abandonné (sauf USA)
protéines recombinante peptides de synthèse
ELISA Ac « sandwich » Ig G /Ig M
4eme
Tests combinés Ag p24 +Ac anti-VIH
5eme
Tests combinés dépistage et différenciation entre anticorps et
Ag p24 et infection par VIH- 1 ou 2
Amélioration progressive des performances en séroconversion :
Sensibilités des 4 et 5eme génération quasi similaire à la biologie
moléculaire
LES LIMITES DU DÉPISTAGE VIH EN 2013
La primo infection : risques de faux négatif , majoré
-
avec les tests de qualité limitée
par la dilution du sang total en TROD
en situation de forte incidence
en cas de souches VIH-1 non sous -type B
Grande variabilité des réponses anticorps selon les sujets
ECLIPSE & PRIMO INFECTION VIH
Seuil de
détection
P24 Ag : 2 UI = 10 pg/mL
50 000 copies/mL
˜
RNA
20 copies HIV-M
˜
D 7- 10
Eclipse period
3 gen
4 gen
Adapted form Cohen et al
EIA tests
TECHNOLOGIE LUMINEX® ET DEPISTAGE VIH
Bioplex® 2200 Ag-Ab Kit, bioRad
BIOPLEX® 2200 HIV AG-AB KIT:
TECHNOLOGIE LUMINEX : EXEMPLE DE REACTIVITE
Bioplex®
2200
(index)
Ag p24
Ab Anti
HIV -2
Ab Anti HIV-1
group M
Ac Anti
HIV-1
group O
BioPlex
Status
HIV -1
group M
0.20
0.08
>200
0.56
Reactive
(>1)
HIV -1
primary
infection
13
0.09
0.08
0.05
Reactive
(>1)
HIV -1
group O
0.19
0.09
0.27
134
Reactive
(>1)
HIV-2
0.33
>200
0.57
0.20
Reactive
(>1)
HIV-1 +
HIV-2 dual
infection
0.23
164
153
0.06
Reactive
(>1)
PROFIL DE 10 PRIMO INFECTION EN TECHNOLOGIE LUMINEX
BIOPLEX® 2200 HIV AG-AB KIT
Architect
BioPlex
HIV-1
Western Blot VIH-1
HIV-1
GP
GP
Index
Ag
Ab
160
120
P
P 55
68
GP
P 40
41
Plasma RNA
P
P25
34
Copies/ mL
1
435
12,58
0,08
> 10 000 000
2
46,5
9,84
0,24
6 340 194
3
46,68
8,73
4,13
6 555 440
4
38,7
1,97
47,23
2 716 540
5
5,18
1,24
5,79
1 082 830
6
9,31
3,63
4,23
1 465 329
7
25,26
10,17
6,2
1 082 830
8
9,65
0,33
30,23
162 020
9
47,82
0,25
113,7
25 456
10
6,2
0,14
13,56
56 178
la confirmation des infections VIH par
Immunoblot
ou Western Blot (?)
Antigènes de synthèse
Inno LIA
Antigènes de lysat viral
New Lav blot
GEENIUS™ HIV 1/2 CONFIRMATION
Recombinant and
peptides
•
• serum, plasma ou sang total
•Datamatrix Barcode
• interpretation automatisée < 30 minutes,
Geenius™ HIV 1/2 Confirmatory
< 30 mn
•
Datamatrix Barcode
-
Positive identification of both
cartridge and patient ID
-
Link between patient ID and
cartridge ID: 1 cartridge for 1
patient
EVALUATION GEENIUS Hop. St LOUIS
REACTIVITE DU GEENIUS
HIV-2
HIV-1
gp 36
gp 140
p 31
gp 160
P24
gp41
91 EIA -
-
2
-
-
-
-
7 HIV-1+
-
-
7
7
5
7
2 Primary
Infection*
-
-
1
1
0
1
30 HIV-2
30
30
18
14
22
14
10 HIV-O
0
0
7
7
6
10
EVALUATION GEENIUS Hop. St LOUIS PARIS,
SPECIFICITE
26 echantillons 4th EIA + AVEC WESTERN BLOT INDETERMINE
ARN PLASMA NEGATIF
GEENIUS
-
IND
+
13
13
0
HIV-2
HIV-1
gp 36
gp140
p31
gp160
p24
gp41
0
5
3
12
0
7
CHARGES VIRALES & CONFIRMATION VIH
•
•
•
•
•
- GRANDE DIVERSITE GENOMIQUE DES VIH : PRUDENCE
- TESTS SUR LA BASE DES SOUS TYPES B
- AMORCES ET SONDES VARIENT D’UN TEST A L’AUTRE
- SENSIBILITES DIFFERENTES
- SPÉCIFICITÉ :
• UNE CHARGE VIRALE + COMME TEST DE CONFIRMATION ??
• A PARTIR DE QUEL SEUIL ???
CHARGES VIRALES & CONFIRMATION VIH
Aptima HIV-1 RNA Qualitative Assay as an
Alternative to Western Blot
69 + /70 +
50/50 -
TESTS DE DIAGNOSTIC RAPIDE (TROD/TDR)
- Existe depuis 1990
- pour les urgences sur sérum
- largement utilisés dans les pays aux faibles structures sanitaires :
PED & USA
- rebaptisés « TROD » (TR à orientation diagnostique)
dans leur utilisation associative
- Marché anarchique ++ duquel les grands noms
du diagnostic sont le + souvent absents ou ont revendu leurs
produits
- Fabrication/assemblage en Asie
LES TDR / TROD : UN MARCHÉ ANARCHIQUE
Un contrôle limité au niveau européen
Différent de celui des tests EIA
Rôle des organismes notifiés (structures privées) : le marquage CE peut
être apposé par l’industriel après avoir obtenu un certificat de
conformité émis par un organisme notifié de l’UE quelque soit le pays .
Puis obscurité des rapports entre
- fabricants (Asie)
- mandataires (Europe)
- commerciaux (Locaux)
Une absence d’évaluation en situation réelle sur sang total et sur salive
Circulation des pires TDR sur Internet
VIKIA & INSTI : GAMME DE DILUTIONS
Résultat attendu
-
+
(1/100 000)
Résultat INSTI
Résultat VIKIA
-
-
+
++
(1/10 000)
++
+++
++++
(1/1 000)
(1/1 000)
pos
+++
pos
++++
Moindre sensibilité de INSTI dans les hautes dilutions
ECHEC DU TEST RAPIDE HIV POUR DÉTECTION SIMULTANÉE AC
VIH1 ET 2 ET AG P24
Prospective study 4 villes Africaines Kigali
and Ndola, Kitwe and Lusaka
Seul 1 echantillon de primo
infection detecté + par
Determine 4G [Ac + Ag]
pour 34 patients en PIH Ag + Ac-
Neg
+ Ac
+ Ag
+ Ac et Ag
William Kilembe, PlosOne 2012
Nouveaux réactifs à l’étude mais « pêché originel » de sensibilité
ORAQUICK IN-HOME HIV TEST SYSTEM –
KIT CONTENTS
Test stand
Stepwise
Instructions
Package Insert
Pre & Post-Test
Informational Booklet
Pouched
Device
Test Device
Pouched
Developer Vial
AUTO TEST SALIVAIRE : EXEMPLE DE REALISATION
1 Achat pharmacie-drugstore (USA) ou INTERNET
4 - Tube de tampon mis en place
2- Présentation du coffret ouvert avec tiroir
5 -dépôt de la salivette après recueil
3- notices explicatives
6- évacuation des dechêts
SITUATION DU SUJET
• FDA juillet 2012 : vente libre des autotests salivaires
aux USA
• - octobre 2012 : l’autotest salivaire OraQuick InHome est disponible dans plus de 30.000 points de
vente et en ligne aux Etats-Unis :
– Conseillé tous les 3-6 mois si haut risque (USA)
– Ne détecte pas les primo infections : > 3mois
après le risque (USA)
OraQuick® In-Home HIV TestA Simple Test Using Oral Fluid
1. Swab upper and lower gums once
each with flat pad of test device
2. Insert device in Developer Vial. Read
result between 20 and 40 minutes
One line = Negative
Two lines = Positive
SENSIBILITE DES TEST SUR FLUIDE ORAL (LIQUIDE CRAVICULAIRE)
200 HIV + Pts
Hôpital Saint Louis, Paris 2009, Oral salive ou sang total
Overall sensitivity
% of valid tests
-
Oraquik
Oral fluid
Oraquick
blood
Vikia
blood
Determine
blood
INSTI
blood
Determine
Combo
Ag +Ab
blood
86.5%
94.5%
98.5%
94.9%
99%
95.8%
[81-90.5]
[90.496.9]
[95.699.5]
[90.897.2]
[96.399.7]
[91.697.9]
Sensibilité
ETUDE St Louis
86.5%
[81-90.5]
HAART
Mais
TROD sang +
USA : PRINCIPALES DONNÉES DE L’ÉTUDE CLINIQUE
ORAQUICK EN 2012 (N= 5055)
• 99% ont réussi le test avec un résultat (positif ou
négatif)
• 88/96 sujet auto identifiés HIV +
sensibilité = 92%
• Spécificité observée specificity = >99.9%
• NPV= 99.8%
• PPV=98.9%
• Octobre 2013 : 4000 à 4500 tests vendus
/mois
The OraQuick In Home HIV test octobre 2013
• July 3, 2012 FDA approval
– Clinical trials conducted in 19 geographically
dispersed sites, selected largely to reach high
prevalence areas
• Subjects represented diversity in age, ethnicity, sexual
orientation, income and literacy levels
• Prevalence of HIV positives identified by self testing in
OraQuick trials was 1.7%
– Study demonstrated device accuracy and high
consumer comprehension of labeling
Confidential & Proprietary
28
88 PATIENTS AUTO IDENTIFIÉS VIH + PAR ORAQUICK® IN-HOME TEST
(ORAQUICK CLINICAL TRIAL 2012)
Prevalence VIH + par auto test USA = 1.7%
25
22
20
19
20
15
10
7
4
5
4
3
3
3
2
1
0
e
al
M
nno
SM
Fe
M
M
ID
ef
pr
x
se
o
-n
e
al
M
SM
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O
m
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m
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W
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M
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M
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M
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M
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M
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M
te
hi
le
a
W
m
SM
k
ac
k
ac
k
ac
Bl
Bl
Bl
The OraQuick In Home HIV test USA Octobre 2013
– Over 200K units purchased by consumers launch to date (30 sept 13)
– Demographic review of high volume sales regions and stores suggests
higher usage by MSM and African American populations
– Sales skew toward urban, high prevalence markets
– Estimated prevalence rate of OTC user population: 1-2%
• Consumer experience with full product offering has been
positive
– Overall consumer complaint rate low (<.1%)
– On line product reviews extremely favorable
Confidential & Proprietary
30
LIMITES DES AUTO TESTS
• Difficulté de reconnaissance des primo infections
• Sensibilité moindre (primo-infection et variant) risque
de faux-négatifs y compris dans le(s) semaines suivants la
séroconverion en EIA
• Faux positifs
• Lecture subjective
• le problème d’élimination des déchets infectieux limité
avec le test oral
• Manque de counseling
• Pas d’archivage - traçabilité
• Négligence des autres IST
• coûts (33 $)
VIH ET AUTO TESTS
NOUVEAU PARADIGME
• - Liberté du sujet > à sa biologie
- Alternatives en Afrique , limitée en France
- Economique
- Confidentialité
– Prevention mère –enfant
Risques de dérive
- réels ou non
- Perte du contrôle épidémiologique
AUTO TEST : QUIZ

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